Лабораторная диагностика Helicobacter pylori
Прошло почти четверть века с того дня, когда патологоанатом из австралийского города Перт Робин Уоррен обнаружил в образцах ткани нижней части желудка колонии бактерий. Ничего удивительного, если бы не одно сделанное им наблюдение: бактерии присутствовали только в тех образцах, где налицо был воспалительный процесс слизистой оболочки желудка.
Данные Уоррена заинтересовали молодого стажера Барри Маршалла. Он вырастил в лаборатории культуру, впоследствии названной Helicobacter pylori. Эти микроорганизмы были обнаружены почти у всех пациентов с гастритом, язвой желудка и двенадцатиперстной кишки. Исследователи предположили, что именно заражение Helicobacter pylori лежит в основе этиологии воспалительных процессов в желудке. Тогда, в 1982 году, гипотеза Маршалла и Уоррена звучала смело: считалось, что к язвенной болезни приводят нездоровый образ жизни и стрессы. Оказалось, что язва - отнюдь не хронический недуг, а болезнь, от которой можно избавиться, принимая антибиотики. Уоррен и Маршалл доказали, что ни неправильное питание, ни сама кислота сами по себе не являются причинами гастрита, язвы, рака желудка. Все это вторично, а первична бактерия.
Н. pylori принадлежит к домену Bacteria, типу Campylobacterota, классу Campylobacteria, порядку Campylobacterales, семейству Helicobacieriaceae, роду Helicobacter. В патологии человека наибольшее значение имеет Н. pylori. Микроорганизм отнесен к ΙΙΙ группе патогенности и является этиологическим агентом в развитии острого и хронического гастрита, дуоденита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Международное агентство по изучению рака отнесло этот микроорганизм к канцерогенам I группы.
Факторы патогенности Н. pylori:
Подвижность. Благодаря жгутикам и спиралевидной форме бактерия может передвигаться из просвета желудка, где низкий рН, на поверхность слизистой, где он нейтрален.
Прикрепление. У бактерии есть несколько белков (адгезинов), которые связываются с рецепторами клеток слизистой оболочки желудка. Благодаря этому она прикрепляется к желудочному эпителию, что позволяет ей удерживаться на поверхности желудка, несмотря на постоянное обновление эпителия и слизи.
Уреаза. Н. pylori выделяет фермент уреазу, которая расщепляет мочевину на аммиак и углекислый газ. Аммиак нейтрализует кислоту вокруг бактерии — на этом свойстве основаны некоторые тесты для диагностики Н. pylori. Уреаза — разрушает мочевину до аммиака и углекислого газа, меняя значение рН с кислого на щелочное. Уреаза, является собственно маркером инфекции Н. pylori и фактором защиты микроорганизма от действия соляной кислоты, обеспечивает длительное персистирование Н. pylori в желудке человека, усиливает воспалительные реакции посредством активации моноцитов, нейтрофилов, секреции цитокинов, образования свободных радикалов и окиси азота.
Токсины. Возбудитель выделяет токсины, повреждающие слизистую оболочку желудка: эндотоксин (липополисахарид клеточной стенки), белок, активирующий нейтрофилы (napA), вакуолизирующй цитотоксин (VacA), белок CagA, воспалительный белок наружной мембраны (OipA). Не каждый штамм Н. pylori вырабатывает весь набор токсинов. Наиболее опасны бактерии, выделяющие CagA и OipA, они чаще вызывают более тяжёлое воспаление слизистой оболочки с развитием язвы и рака желудка.
Для диагностики хеликобактериоза используются: неивазивные методы, не требующие эндоскопического исследования (иммунохроматографический тест определения антигена Н. pylori в фекалиях (ИХА), 13С уреазный дыхательный тест (УДТ), молекулярно-биологические методы определения ДНК Н. pylori в фекалиях, иммунологический метод (ИФА) и инвазивные, при проведении которых используется биоматериал, отобранный при эзофагогастродуоденоскопии (быстрый уреазный тест (БУТ), гистологический метод, цитологический метод, бактериологический метод, молекулярно-биологические методы определения ДНК Н. pylori в биоптате, желудочном соке).
Показаниями к проведению диагностики хеликобактериоза является: диспепсия, хронический гастрит, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, гастропатия, индуцированная длительным приемом нестероидных противовоспалительных препаратов, необходимость длительного приема нестероидных противовоспалительных препаратов и ингибиторов протонной помпы, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая железодефицитная анемия, идиопатическая В-12 дефицитная анемия, состояние после резекции желудка при новообразованиях, MALT-лимфома желудка, по желанию пациентов, имеющих в анамнезе близких родственников, страдающих раком желудка.
Наиболее оптимальными тестами первичной диагностики Н. pylori-инфекции являются уреазный дыхательный тест и определение антигена Н. pylori в кале с помощью ИХА.
В микробиологической лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Брянской области» проводится быстрый, малозатратный, неинвазивный метод диагностики Н. pylori: определение антигена Н. pylori в фекалиях с помощью иммунохроматографического анализа (ИХА) с использованием моноклональных анти- Н. pylori антител.
Чувствительность и специфичность метода-до 95—98 %.
Прием материала (нативного фекалия) для исследования проводится по адресу: г. Брянск, пр. Ленина, д.72, ежедневно в рабочие дни с 8-30 до 12-00. Телефон для справок 74-53-90.
Срок выдачи результата исследования клинического материала - 1 рабочий день.