Роль диагностики в профилактике инфекционных заболеваний
С увеличением численности населения, ростом миграционных процессов все более масштабным становится распространение инфекций, поэтому своевременное обнаружение их носителей способно предотвратить возникновение и распространение эпидемий. Ранняя и точная диагностика инфекционных болезней имеет большое значение для назначения и проведения адекватной терапии. Наоборот, несвоевременная и/или ошибочная диагностика инфекционной патологии может способствовать возникновению эпидемической вспышки.
Методы лабораторной диагностики сегодня охватывают очень широкий спектр исследований. Результаты лабораторных исследований приобретают большую информативность при их целенаправленном применении, правильной оценке и сопоставлении с клинической картиной болезни.
Для диагностики инфекционного заболевания используют следующие методы:
1) Классический бактериологический метод остается «золотым стандартом» при диагностике большинства современных инфекций. Этот метод предполагает посев материала на плотные питательные среды с последующим выделением и идентификацией чистой культуры микроорганизма, определением чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам и бактериофагам.
В клинической бактериологической диагностике идентификацию проводят только «чистых культур» бактерий, выделенных из исследуемого материала, полученного от больного. С этой целью используют свежеприготовленные, искусственные питательные среды, предварительно разлитые в чашки Петри. Выбор питательной среды для выделения чистой культуры возбудителей имеет важнейшее значение в бактериологической диагностике.
Для первичного посева обычно применяют комплекс сред, включающий среды обогащения, элективные среды, среды с повышенной питательной ценностью для трудно культивируемых микроорганизмов и дифференциально-диагностические питательные среды.
При идентификации культур проводят определение их родовой и видовой принадлежности, а при необходимости и внутривидовое типирование. Результат получают по совокупности данных:
1) морфологических, основанных на выявлении характерных особенностей ультраструктуры возбудителя и их тинкториальных свойств (чаще окраска по Граму);
2) кулътуральных, основанных на выделении чистой культуры микроорганизмов на плотной питательной среде, с изучением особенностей выросших колоний;
3) биохимической активности культур. В том числе: оксидазной и каталазной активности, способности ферментировать углеводы (глюкоза, лактоза, сахароза, мальтоза, маннит и др.), образовывать индол, аммиак и сероводород, являющиеся продуктами протеолитической активности бактерий.
2) Иммунологическая диагностика
Определение антигенов возбудителей с помощью иммунохроматографического анализа (ИХА) часто является единственным методом экспресс-диагностики. Метод ИХА основан на принципе тонкослойной хроматографии и включает реакцию между антигеном и соответствующем ему антителом в биологических материалах. Проводится исследование методом ИХА с помощью специальных тест-полосок, панелей или тест-кассет.
Антитела к возбудителю определяют в серологических реакциях: развернутой реакции агглютинации, непрямой агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммуноферментном и радиоиммунном методах и др.
В настоящее время наиболее точным и высоко специфичным является метод иммуноферментного анализа (ИФА).
ИФА (иммуноферментный анализ) — лабораторный метод количественного и качественного определения веществ белковой природы. В основе тестирования лежит специфическая реакция «антиген-антитело». Тест работает с использованием меченого ферментом антитела или антигена, который связывается с целевым веществом (антигеном или антителом). Когда этот комплекс образуется, добавляется субстрат, который реагирует с ферментом, вызывая изменение цвета. Интенсивность изменения цвета прямо пропорциональна количеству антитела или антигена, присутствующего в образце, что позволяет проводить количественную оценку.
3) Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Метод основан на многократном избирательном копировании определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.
В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА) метод ПЦР позволяет определять непосредственно возбудителя заболевания. С помощью усовершенствованных схем постановки ПЦР можно выявлять патогенные микроорганизмы в очень низкой концентрации.
ЦелесообразностьпроведенияПЦРнаиболееобоснованадлявнутриклеточной,персистирующейилидиссеминированнойинфекции,т.е. сиспользованиемкрови,стерильных сред организма и биоптатов глубоких тканей.
В микробиологической лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Брянской области» проводится бактериологическое исследование биоматериала на микрофлору и чувствительность к антибиотикам. Также проводится исследование методом ПЦР с целью обнаружения широкого круга возбудителей в различном биоматериале, методом ИФА на определение специфических антител в сыворотке крови.
Прием и забор клинического материала для исследования проводится по адресу:
г. Брянск, пр. Ленина, д.72, ежедневно в рабочие дни с 8-30 до 12-00.
Телефон для справок 8(4832) 74-53-90.
Срок выдачи результата бактериологического исследования биоматериала и сыворотки
крови методом ИФА составляет 3-5 рабочих дня, результата ПЦР-исследования – 2 рабочих
дня.
Биолог микробиологической лаборатории Дедушкина Е.А.